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目的 研究克隆宫颈癌HeLa细胞层粘连蛋白受体前体(37-kDa laminin receptor precursor,37LRP)并构建表达载体及成功表达该受体蛋白.方法 采用RT-PCR从宫颈癌HeLa细胞总RNA中扩增人37LRP受体的cDNA序列,克隆到pGEM-T Easy载体上.经过序列测定后插入到表达载体pET22b(+),在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达.结果 构建的表达载体经限制性内切酶分析和DNA测序并与GenBank比对,证明所构建的重组质粒含有37 LRP插入片段,经诱导后表达37 LRP蛋白.结论 成功构建了重组人37LRP表达载体,并获取重组人37 LRP蛋白,为临床肿瘤的研究奠定了基础.

作者:窦洪涛;张清华;朱旭东;党颖;徐龙;李涛;王林萍;董晓文

来源:中国妇产科临床杂志 2011 年 12卷 4期

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作者:
窦洪涛;张清华;朱旭东;党颖;徐龙;李涛;王林萍;董晓文
来源:
中国妇产科临床杂志 2011 年 12卷 4期
标签:
层粘连蛋白受体 基因 克隆 蛋白表达
目的 研究克隆宫颈癌HeLa细胞层粘连蛋白受体前体(37-kDa laminin receptor precursor,37LRP)并构建表达载体及成功表达该受体蛋白.方法 采用RT-PCR从宫颈癌HeLa细胞总RNA中扩增人37LRP受体的cDNA序列,克隆到pGEM-T Easy载体上.经过序列测定后插入到表达载体pET22b(+),在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达.结果 构建的表达载体经限制性内切酶分析和DNA测序并与GenBank比对,证明所构建的重组质粒含有37 LRP插入片段,经诱导后表达37 LRP蛋白.结论 成功构建了重组人37LRP表达载体,并获取重组人37 LRP蛋白,为临床肿瘤的研究奠定了基础.