目的 建立应用核酸内切酶Surveyor酶切法快速检测MTB对吡嗪酰胺(pyrazinamide,PZA)耐药性的方法,并对其临床价值进行评估.方法 选取来自武汉市肺科医院的耐多药(MDR)MTB菌株91株作为研究对象.分别以上游引物∶下游引物为2 ∶ 5的比例扩增所有菌株,同时以上游引物∶下游引物为5 ∶ 2的比例扩增结核分枝杆菌标准株H37Rv,然后将PCR产物以1 ∶ 1的比例混合杂交,应用核酸内切酶Surveyor酶切反应产物后进行电泳.以杂交条带能够被核酸内切酶Surveyor酶切割作为判定pncA基因及其启动子序列存在基因突变的依据.以BACTEC MGIT 960检测MTB对PZA耐药性方法和MTB的pncA基因及其启动子区基因序列测定法作为对照,评价核酸内切酶Surveyor酶切法的应用价值.结果 以BACTEC MGIT 960法检测PZA耐药性作为对照,核酸内切酶Surveyor酶切法检测PZA耐药的敏感度为100.0％(29/29),特异度为87.1％(54/62),准确度为91.2％(83/91).以MTB的pncA基因及其启动子区的基因测序结果作为对照,核酸内切酶Surveyor酶切法检测MTB对PZA耐药的敏感度为100.0％(37/37),特异度为100.0％(54/54),准确度为100.0％(91/91).结论 核酸内切酶Surveyor酶切法检测pncA基因及其启动子区突变的性能与基因测序高度一致,可以为没有基因测序条件的地区检测MTB对PZA
作者：胡严杰；龚世伟；任易
来源：中国防痨杂志 2021 年 43卷 8期
