目的:探讨结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)乙酰转移酶fadA3对宿主蛋白乙酰化修饰、基因表达和MTB在体内存活的影响.方法:从首都医科大学附属北京胸科医院/北京市结核病胸部肿瘤研究所分子生物学实验室选取MTB标准株(H37Rv),利用CRISPR-cas系统辅助的非同源性末端接合技术(CRISPR-NHEJ)构建H37Rv-fadA3基因敲除株(△fadA3),利用微孔板法分别检测H37Rv和△fadA3在7H9液体培养基中的吸光度值(A值)和细菌活性,绘制生长曲线图和最低抑菌浓度表.运用免疫印迹和转录组学测序分析H37Rv和△fadA3感染巨噬细胞(巨噬细胞系THP-1分化得到)后蛋白质乙酰化修饰变化及基因表达的差异情况;采用菌落计数和苏木精-伊红染色法分析H37Rv和△fadA3在C57BL/6J小鼠肺组织和巨噬细胞中的存活及病理变化.结果:fadA3经敲除1116 bp片段后成功获得△fadA3敲除株.H37Rv和△fadA3在培养第3、6、9和12天的Aeoo值(分别为 0.245±0.005 和 0.232+0.013、0.403+0.122 和 0.385±0.009、0.444±0.010 和 0.442+0.005、0.675±0.027 和 0.662±0.026)差异均无统计学意义(t 值分别为 1.623、2.351、0.178、0.848,P 值均＞0.05);二者对异烟肼、乙胺丁醇、链霉素、左氧氟沙星、PA-824、利奈唑胺、氯法齐明、利福平、贝达喹啉、德拉

作者：段玉衡；张蓝月；董静；史雨婷；贾红彦；李自慧；邢爱英；杜博平；孙琦；潘丽萍；朱传智；张宗德

来源：中国防痨杂志 2023 年 45卷 4期