目的:设计构建Pgenesil－1质粒载体介导的表达ERCClshRNA的重组体质粒.方法:以ERCC1为靶基因,以Pgenesil－1质粒为载体,设计构建重组体,根据ERCCl基因cDNA序列,设计有小发卡结构的2条寡核苷酸序列,克隆到空载体Pgenesil－1中,转化DH5a菌株,提取质粒,进行酶切鉴定和测序分析.结果:经酶切鉴定筛出的重组体测序结果和目的序列相同,重组体载体构建成功.结论:成功构建了能表达ERCClshRNA的质粒载体Pgenesil－1/ERCC11和Pgenesil－1/ERCC12,为下一步研究ERCC1基因在卵巢癌细胞株顺铂耐药中的作用奠定了实验基础.
作者：黄勇；王绍海；胡沙；王泽华
来源：中国妇幼保健 2008 年 23卷 14期
