目的 探索均匀设计在优化实时定量PCR检测条件中的应用,确立心钠素基因实时定量的最佳条件.方法 以乳鼠心肌细胞cDNA为模板,退火温度和引物浓度为影响因素,应用均匀设计法探索影响心钠素基因实时荧光定量PCR的扩增条件;量化不同实验条件下的扩增效果,在最优的扩增条件下建立ANP基因定量扩增的相对标准曲线,并检测扩增效率.结果 通过均匀设计法的试验设计,用8个试验点.完成了对温度和引物浓度2因素8水平的实验条件优化,建立了ANP基因实时定量PCR检测的最佳组合,为退火温度59.2℃,引物终浓度200μM.结论 均匀设计是一种简便易行、快速经济的实时定量PCR检测条件的优化方法.
作者：宋莉；叶珏；王林；王慧；孟宪敏
来源：中国分子心脏病学杂志 2010 年 11卷 3期
