目的消除巢式聚合酶链反应(nested PCR)检测乙型肝炎病毒(HBV)实验中2次加样带来交叉污染的机会,提高PCR特异性和敏感性.方法通过设计内部、外部引物的不同长度和不同反应浓度,改变退火温度,建立半巢式PCR一次加样法检测HBV DNA.3个PCR引物同时加入反应管进行2次PCR反应,在一个反应管内完成巢式PCR.结果该法可检出4个分子的目的基因片段.在16例ELISA和常规PCR检测HBV阴性的血清标本中,半巢式PCR一次加样法检出2例阳性.结论该方法简便、敏感、特异.与ELISA同时应用,可提高临床标本HBV阳性检出率,减少假阴性,这对减少输血等引起的HBV传播具有积极意义.
作者：肖生祥；闰呼玲；吴艳红；肖生彬
来源：中国公共卫生 2002 年 18卷 5期
