目的对构建重组腺病毒的AdEasy载体系统的操作过程予以改进,使其更加简便、高效.方法将腺病毒骨架载体pAdEasy-1用电穿孔法转化大肠埃希菌BJ5183,获得含pAdEasy-1的大肠埃希菌BJ5183/p菌株.氯化钙法制备大肠埃希菌BJ5183/p感受态细胞,并转化含绿色荧光蛋白的穿梭载体,通过同源重组获得重组腺病毒质粒.以限制性内切酶Pac Ⅰ酶切,得到重组腺病毒DNA分子,转染293细胞.结果293细胞出现细胞病变,荧光显微镜观察有绿色荧光.结论成功获得一种以AdEasy系统为基础的简便、高效构建重组腺病毒的新方法.
作者：张梅；何金生；朱梅；汪红俊
来源：中国公共卫生 2005 年 21卷 1期
