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目的 研究1,25双羟维生素D3[1.25-(OH)2D3]及染料木素(genistein)对人成骨样SaOS-2细胞的作用.方法 培养人成骨样SaOS-2细胞,经1,25-(OH)2D3、genistein及二者联合应用后,用硝基苯磷酸二钠法(p-nitrophenylphosphate,pNPP)测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测ALP及骨保护素(osteoprotegerin,OPG)mRNA水平的变化.免疫印记法测定OPG蛋白表达.结果 1,25-(OH)2D3及genistein可显著提高ALP活性,但对ALP mRNA的表达没有影响.二者联合应用有协同作用,可显著提高ALP活性及mRNA的表达(P<0.01).1,25-(OH)2在D3组可显著降低OPG mRNA及蛋白的表达,而与genistein共用时,此抑制作用消失(P<0.01).结论 1,25-(OH)2D3及genistein在促进人成骨样SaOS-2细胞的分化过程存在协同作用,genistein通过调控OPG基因及蛋白的表达抑制1,25-(OH)2D3对破骨细胞的促进作用,从而促进骨的形成.

作者:耿磊;陈文芳

来源:中国骨质疏松杂志 2008 年 14卷 4期

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作者:
耿磊;陈文芳
来源:
中国骨质疏松杂志 2008 年 14卷 4期
标签:
1,25双羟维生素D3 染料木素 骨肉瘤细胞 碱性磷酸酶 骨保护素
目的 研究1,25双羟维生素D3[1.25-(OH)2D3]及染料木素(genistein)对人成骨样SaOS-2细胞的作用.方法 培养人成骨样SaOS-2细胞,经1,25-(OH)2D3、genistein及二者联合应用后,用硝基苯磷酸二钠法(p-nitrophenylphosphate,pNPP)测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测ALP及骨保护素(osteoprotegerin,OPG)mRNA水平的变化.免疫印记法测定OPG蛋白表达.结果 1,25-(OH)2D3及genistein可显著提高ALP活性,但对ALP mRNA的表达没有影响.二者联合应用有协同作用,可显著提高ALP活性及mRNA的表达(P<0.01).1,25-(OH)2在D3组可显著降低OPG mRNA及蛋白的表达,而与genistein共用时,此抑制作用消失(P<0.01).结论 1,25-(OH)2D3及genistein在促进人成骨样SaOS-2细胞的分化过程存在协同作用,genistein通过调控OPG基因及蛋白的表达抑制1,25-(OH)2D3对破骨细胞的促进作用,从而促进骨的形成.