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目的 研究不同剂量、多疗程地塞米松对大鼠成骨细胞生物活性及Wnt信号通路的影响,以进一步探讨Wnt信号通路在皮质激素性骨质疏松的作用.方法 用改良组织法培养大鼠颅骨成骨细胞,采用倒置相差显微镜及碱性磷酸酶染色法观察成骨细胞形态,将大鼠成骨细胞分为四组,分别用含不同浓度的地塞米松(0 mol/L、10-8 mol/L、10-7 mol/L、10-6mol/L)的DMEM(H)培养基培养,于作用后6h、12h、24 h、48 h,采用RT-PCR检测Wnt信号转导途径中Wnt7b、LRP 5、LRP 6、β-catenin基因mRNA表达及Wnt通路抑制因子DKK-1基因mRNA表达;于作用后ld、2d、3d、5d、7d,采用MTS法检测地塞米松对成骨细胞增殖的影响;于作用后21 d,采用茜素红钙结节染色及油红O染色,观察地塞米松对成骨细胞成骨及成脂活性的影响.结果 与地塞米松0 mmol/L组对比,在浓度10-6 mmol/L、10-7 mol/L的地塞米松作用下,成骨细胞的成脂活性增强,胞浆中出现大量脂滴,成骨细胞的增殖、骨形成活性明显受到抑制;RT-PCR结果显示地塞米松10-6 mmol/L、10-7 mol/L组Wnt7b(32.01 ±0.01、31.71±0.04)、LRP 5(23.28±0.12、23.31±0.10)、LRP 6(23.03±0.18、22.31±0.54)及β-catenin基因mRNA的表达量(30.78±0.42、29.14±0.82)均显著低于0mmol/L组(Wnt7b:33.04±0.19,LRP5

作者:谢小伟;裴福兴;康鹏德;杨静;沈彬;周宗科

来源:中国骨质疏松杂志 2013 年 19卷 8期

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作者:
谢小伟;裴福兴;康鹏德;杨静;沈彬;周宗科
来源:
中国骨质疏松杂志 2013 年 19卷 8期
标签:
糖皮质激素 成骨细胞 Wnt信号通路 骨质疏松 Glucocorticoid Osteoblasts Wnt signal pathway Osteoporosis
目的 研究不同剂量、多疗程地塞米松对大鼠成骨细胞生物活性及Wnt信号通路的影响,以进一步探讨Wnt信号通路在皮质激素性骨质疏松的作用.方法 用改良组织法培养大鼠颅骨成骨细胞,采用倒置相差显微镜及碱性磷酸酶染色法观察成骨细胞形态,将大鼠成骨细胞分为四组,分别用含不同浓度的地塞米松(0 mol/L、10-8 mol/L、10-7 mol/L、10-6mol/L)的DMEM(H)培养基培养,于作用后6h、12h、24 h、48 h,采用RT-PCR检测Wnt信号转导途径中Wnt7b、LRP 5、LRP 6、β-catenin基因mRNA表达及Wnt通路抑制因子DKK-1基因mRNA表达;于作用后ld、2d、3d、5d、7d,采用MTS法检测地塞米松对成骨细胞增殖的影响;于作用后21 d,采用茜素红钙结节染色及油红O染色,观察地塞米松对成骨细胞成骨及成脂活性的影响.结果 与地塞米松0 mmol/L组对比,在浓度10-6 mmol/L、10-7 mol/L的地塞米松作用下,成骨细胞的成脂活性增强,胞浆中出现大量脂滴,成骨细胞的增殖、骨形成活性明显受到抑制;RT-PCR结果显示地塞米松10-6 mmol/L、10-7 mol/L组Wnt7b(32.01 ±0.01、31.71±0.04)、LRP 5(23.28±0.12、23.31±0.10)、LRP 6(23.03±0.18、22.31±0.54)及β-catenin基因mRNA的表达量(30.78±0.42、29.14±0.82)均显著低于0mmol/L组(Wnt7b:33.04±0.19,LRP5