目的：探索Wnt3 a信号分子对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化过程中端粒酶活性的影响。方法采用密度梯度离心联合贴壁筛选法分离培养SD大鼠股骨骨髓间充质干细胞。传代后通过形态学和流式细胞学检测细胞表面标志物CD29、CD44、CD45，筛选并鉴定细胞。采用成骨诱导培养基联合不同浓度的wnt3a（5 ng/mL、25 ng/mL、100 ng/mL）诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化，以碱性磷酸酶活性检测评价其成骨分化能力。通过TRAP-ELISA端粒酶活性检测法检测在不同浓度的wnt3a干预下诱导骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化过程中端粒酶活性的表达。结果骨髓间充质干细胞传至第3代后可获得均一性较高的细胞，流式细胞学检测细胞表面标志物CD29、CD44高表达，CD45低表达。成骨诱导培养基联合不同浓度的wnt3a诱导大鼠BMSCs 7 d后，碱性磷酸酶（Alkaline Phosphatase，ALP）活性检测结果：与普通成骨诱导培养基相比，含有5 ng/mL及25 ng/mL wnt3a的成骨诱导培养基可显著增加其碱性磷酸酶（ALP）活性（P＜0.05），而含有100 ng/mL wnt3a的成骨诱导培养基则明显抑制其碱性磷酸酶（ALP）活性（P＜0.05）。与普通成骨诱导培养基相比，联合诱导培养基诱导骨髓间充质干细胞成骨分化过程中，端粒酶活性的改变无明显的统计学差异。结
作者：胡江伟；王亮；马远征；张妍；杨帆；杨国花；王文娇；付雪梅
来源：中国骨质疏松杂志 2014 年 1期
