目的 利用TaqMan-MGB探针技术,建立水痘-带状疱疹病毒(VZV)的荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测方法 ,用于临床标本VZV的检测.方法 从GenBank上下载几十株VZV基因组序列,在IE 62基因的保守区域设计引物与TaqMan-MGB探针,并对反应条件和体系进行优化,同时评价建立检测体系的特异性、敏感性和重复性;利用已知拷贝数的质粒标准品的病毒脱氧核糖核酸(DNA),建立了VZV基因拷贝数定量分析模型.结果 该方法 与引起相似发病症状的肠道病毒71型,柯萨奇病毒A、B组以及腺病毒均无交叉反应,具有很高的特异性,且灵敏度达到102拷贝,优于常规PCR方法 .采用该法对8份疑似水痘、带状疱疹患者疱疹液标本检测均为阳性,较病毒分离、常规PCR法更为简便、快速、敏感.结论 该方法 适合临床早期感染病例的确认以及水痘、带状疱疹爆发疫情的应急诊断.
作者:史雯;卢亦愚;严菊英;冯燕;茅海燕;徐昌平
来源:中国计划免疫 2007 年 13卷 2期