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目的 明确肺常规树突状细胞(cDCs)对急性肺损伤(ALI)早期炎症反应和肺损伤的影响,以及其具体的作用机制.方法 C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(A组)、ALI组(B组)、FLT3L预处理组(C组)、来他替尼预处理组(D组)和DMSO对照组(E组),分别给予FLT3L、来他替尼预处理5d后复制ALI模型,6h及24h后处死小鼠留取肺组织,采用流式细胞术检测CD11c +CD11b+双阳性细胞比例,评价肺cDCs的数量;检测肺cDCs的MHCⅡ及CD80表达比例.评价肺cDCs的成熟程度;ELISA检测IL-6、TNF-α评价,肺部炎症反应的强度;计算肺湿质量/体质量比(LWW/BW),评价肺水肿程度;肺组织HE染色行组织病理学检查评价肺损伤程度;比色法检测肺髓过氧化物酶(MPO)活性,评价中性粒细胞的浸润;qRT-PCR检测转录因子T-bet及GATA-3 mRNA的表达比例,评价辅助性T细胞Th1/Th2亚群漂移;ELISA检测IFN-γ及IL-4表达,评价Th1/Th2细胞因子的平衡.结果 肺cDCs聚集及成熟程度高峰出现于ALI成模后6h.FLT3L预处理显著增加肺cDCs的聚集和成熟程度,肺cDCs数量(4.98±1.96),MHCⅡ分子表达(71.52±6.75),CD80表达(2.18 ±0.85),上调肺部炎症反应并加重肺损伤,同时肺MPO活性(8.58±0.87)、T-bet/GATA-3的表达比例(5.98 ±0.94)和肺IFN-γ水平(65.80 ±6.23)均显著上升.来他替尼预处理显

作者:董亮;徐静媛;刘军;刘玲;杨毅;邱海波

来源:中国急救医学 2016 年 36卷 2期

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作者:
董亮;徐静媛;刘军;刘玲;杨毅;邱海波
来源:
中国急救医学 2016 年 36卷 2期
标签:
急性肺损伤(ALI) 常规树突状细胞(eDCs) 炎症反应 中性粒细胞浸润 Th免疫反应 发病机制 Acute lung injury (ALI) Conventional dendritic cells (cDCs) Inflammation Neutrophils infiltration T-helper-cell response Pathogenesis
目的 明确肺常规树突状细胞(cDCs)对急性肺损伤(ALI)早期炎症反应和肺损伤的影响,以及其具体的作用机制.方法 C57BL/6小鼠随机分为正常对照组(A组)、ALI组(B组)、FLT3L预处理组(C组)、来他替尼预处理组(D组)和DMSO对照组(E组),分别给予FLT3L、来他替尼预处理5d后复制ALI模型,6h及24h后处死小鼠留取肺组织,采用流式细胞术检测CD11c +CD11b+双阳性细胞比例,评价肺cDCs的数量;检测肺cDCs的MHCⅡ及CD80表达比例.评价肺cDCs的成熟程度;ELISA检测IL-6、TNF-α评价,肺部炎症反应的强度;计算肺湿质量/体质量比(LWW/BW),评价肺水肿程度;肺组织HE染色行组织病理学检查评价肺损伤程度;比色法检测肺髓过氧化物酶(MPO)活性,评价中性粒细胞的浸润;qRT-PCR检测转录因子T-bet及GATA-3 mRNA的表达比例,评价辅助性T细胞Th1/Th2亚群漂移;ELISA检测IFN-γ及IL-4表达,评价Th1/Th2细胞因子的平衡.结果 肺cDCs聚集及成熟程度高峰出现于ALI成模后6h.FLT3L预处理显著增加肺cDCs的聚集和成熟程度,肺cDCs数量(4.98±1.96),MHCⅡ分子表达(71.52±6.75),CD80表达(2.18 ±0.85),上调肺部炎症反应并加重肺损伤,同时肺MPO活性(8.58±0.87)、T-bet/GATA-3的表达比例(5.98 ±0.94)和肺IFN-γ水平(65.80 ±6.23)均显著上升.来他替尼预处理显