目的 探讨血管内皮细胞热损伤后培养上清对巨噬细胞极化的影响及机制.方法 小鼠肺微血管内皮细胞系(MPVECs)给予40℃热刺激不同时间后,观察细胞状态和活力,ELISA检测培养上清中趋化因子5(CCL5)含量,选取合适的刺激时间;构建MPVECs热处理上清与小鼠巨噬细胞系(RAW264.7)共培养体系,对照组予以正常培养3 h上清,处理组予以40℃处理3 h上清,干预组予以40℃处理3 h上清,同时加入Maraviroc,阻断CCL5/趋化因子5受体(CCR5)轴,培养6 h后流式细胞术观察巨噬细胞M1/M2极化,qPCR检测促炎相关细胞因子mRNA表达,ELISA检测培养上清细胞因子含量.结果 MPVECs给予40℃热处理3 h细胞形态较完整,培养上清CCL5含量较高,适合用于刺激RAW264.7细胞;处理组、干预组予以不同处理后RAW264.7细胞M1极化明显上升(P<0.01),予以Maraviroc,阻断CCL5/CCR5轴,M1极化下降(P<0.01).处理组、干预组予以不同处理后促炎细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达和培养上清含量均上升(P<0.05),阻断CCL5/CCR5途径明显减少IL-1β的表达(P<0.01).结论 血管内皮细胞受到热损伤时可以释放CCL5,通过CCL5/CCR5轴调控巨噬细胞向促炎的M1型极化并释放促炎细胞因子,靶向阻断CCL5/CCR5轴抑制巨噬细胞M1极化和相关促炎细胞因子分泌.
作者：张玲琴；谢建刚；王倩梅；徐云云；黄杨
来源：中国急救医学 2022 年 42卷 6期
