目的 建立一种快速、灵敏、特异的荧光定量RT-PCR检测肠道病毒的方法.方法 根据GenBank中肠道病毒5′UTR序列,应用生物软件在保守区设计与筛选特异引物和TaqMan探针,对荧光定量RT-PCR反应体系与条件进行优化,验证方法的特异性、敏感性和重复性.并通过对急性临床样本的检测,评价该方法的实际应用价值.结果 该方法对肠道病毒包括脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型及柯萨奇病毒和埃可病毒等的检测有高度特异性,甲肝病毒、乙脑病毒、登革病毒、腺病毒、单纯疱疹病毒、诺如病毒等均呈阴性.该方法的检测下限达10-1TCID50/100 μl.12份急性结膜炎病例结膜拭子标本中7份肠道病毒核酸阳性,普通RT-PCR方法5份阳性.结论 TaqMan荧光定量RT-PCR方法快速、敏感、特异,适于肠道病毒的快速检测.
作者：陈秋霞；吴德；李晖；莫艳玲；邹丽容；方苓；黄平；柯昌文
来源：中国病原生物学杂志 2008 年 3卷 11期
