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目的 在大肠杆菌中表达恶性疟原虫乳酸脱氢酶(LDHp)与谷胱甘肽S转移酶(GST)融合蛋白,测定重组蛋白的免疫活性。方法 采用PCR方法特异性扩增恶性疟原虫(海南株)乳酸脱氢酶基因,经双酶切后克隆入pGEX-4T-1表达载体中,重组蛋白纯化后免疫小鼠制备特异性血清,并用琼脂双向扩散法检测效价,ELISA、Western-bloting检测重组抗原的免疫活性。结果 得到了重组表达的蛋白抗原,表达产物能与兔抗恶性疟原虫血清发生反应,并能诱导小鼠产生特异性体液免疫应答,免疫琼脂扩散法抗体滴度为1:16。结论 LDHp在大肠杆菌中获得高效表达且表达产物具有良好的抗原性。

作者:吴英松;李明;董文其;李英杰

来源:中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2001 年 19卷 2期

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作者:
吴英松;李明;董文其;李英杰
来源:
中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2001 年 19卷 2期
标签:
恶性疟原虫 乳酸脱氢酶 表达 免疫活性
目的 在大肠杆菌中表达恶性疟原虫乳酸脱氢酶(LDHp)与谷胱甘肽S转移酶(GST)融合蛋白,测定重组蛋白的免疫活性。方法 采用PCR方法特异性扩增恶性疟原虫(海南株)乳酸脱氢酶基因,经双酶切后克隆入pGEX-4T-1表达载体中,重组蛋白纯化后免疫小鼠制备特异性血清,并用琼脂双向扩散法检测效价,ELISA、Western-bloting检测重组抗原的免疫活性。结果 得到了重组表达的蛋白抗原,表达产物能与兔抗恶性疟原虫血清发生反应,并能诱导小鼠产生特异性体液免疫应答,免疫琼脂扩散法抗体滴度为1:16。结论 LDHp在大肠杆菌中获得高效表达且表达产物具有良好的抗原性。