目的在原核表达体系大肠埃希菌中进行日本血吸虫组织蛋白酶L1(SjCL1)基因表达.方法通过PCR从质粒pcDNA3-SjCL1中扩增得到SjCL1基因,定向克隆至原核表达载体pGEX-4T-1中,构建重组质粒pGEX-SjCL1,将该重组质粒转化大肠埃希菌JM109,转化子经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法(Western blotting)分析SjCL1基因表达产物.结果获得长约1kb的PCR片段,构建了pGEX-SjCL1质粒.SDS-PAGE和Western blotting检测表达产物,相对分子质量为62 000.结论SjCL1基因在大肠埃希菌中以融合形式得到表达.
作者:易冰;李卓雅;何蔼;郑小英;郑斌;周豪杰;王轶;张瑞林;余南;詹希美
来源:中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2004 年 22卷 2期