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目的构建伯氏疟原虫青蒿素抗性相关的消减cDNA文库.方法提取伯氏疟原虫K173株(NS)与青蒿素抗性株(AR)的总RNA,super SMART法合成双链cDNA,分别以NS为消减方(driver),AR为试验方(tester)及AR为driver,AS为tester进行双向抑制性消减PCR(SSH PCR).富集的差异表达cDNA克隆到pMD18-T载体构建消减文库.结果NS-AR和AR-NS消减文库分别获得395个和506个阳性克隆,从NS-AR和AR-NS文库中随机挑取108个克隆PCR鉴定,分别有100个和104个含插入片段,大小在0.25~2 kb之间.结论成功构建了伯氏疟原虫青蒿素抗性相关的消减cDNA文库.

作者:贝祝春;王京燕

来源:中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2004 年 22卷 3期

知识库介绍

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作者:
贝祝春;王京燕
来源:
中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2004 年 22卷 3期
标签:
伯氏疟原虫 青蒿素 抗药性 PCR 基因文库
目的构建伯氏疟原虫青蒿素抗性相关的消减cDNA文库.方法提取伯氏疟原虫K173株(NS)与青蒿素抗性株(AR)的总RNA,super SMART法合成双链cDNA,分别以NS为消减方(driver),AR为试验方(tester)及AR为driver,AS为tester进行双向抑制性消减PCR(SSH PCR).富集的差异表达cDNA克隆到pMD18-T载体构建消减文库.结果NS-AR和AR-NS消减文库分别获得395个和506个阳性克隆,从NS-AR和AR-NS文库中随机挑取108个克隆PCR鉴定,分别有100个和104个含插入片段,大小在0.25~2 kb之间.结论成功构建了伯氏疟原虫青蒿素抗性相关的消减cDNA文库.