目的 用环介导等温扩增(LAMP)技术检测弓形虫.方法 用酚-氯仿法提取弓形虫速殖子基因组DNA,设计两对扩增弓形虫B1基因的LAMP引物.以间日疟原虫、恶性疟原虫、卡氏肺孢子虫、日本血吸虫及小鼠白细胞作对照.进行LAMP反应,产物经SYBR Green I显色及电泳后观察结果 ,绿色判为阳性,棕色判为阴性.将弓形虫速殖子经倍比稀释为(2～3)×106个/ml至(2～3)×10-1个/ml等8个浓度,进行LAMP反应,验证该方法 的敏感性.结果 LAMP反应结果显示,弓形虫速殖子检测管经显色后呈绿色,对照组均呈棕色.弓形虫的LAMP产物经电泳后呈LAMP特征性梯状条带,对照组均无扩增产物.LAMP技术可检测到的弓形虫速殖子最低浓度为2～3个/ml.结论 LAMP技术在弓形虫检测中显示出较好的特异性与敏感性.
作者：杨秋林；张如胜；伍和平；张愉快；王可耕
来源：中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2008 年 26卷 4期
