目的 观察弓形虫MIC8基因和基因免疫佐剂白细胞介素(IL-12)共免疫小鼠所诱导的免疫保护性.方法 将编码弓形虫MIC8的基因插入到真核表达质粒载体pc DNA3.1中,构建真核表达质粒pcMIC8,并转染至HeLa 细胞,蛋白免疫印迹分析(Western blotting)检测重组蛋白的表达情况.80只昆明小鼠随机均分为5组,分别为对照组(PBS组、pcDNA3.1空质粒组、pcIL-12质粒组)、pcMIC8质粒组以及pcMIC8+pcIL-12质粒共免疫组.共免疫组以pcMIC8质粒和pcIL-12质粒各100 μg(溶于100μl PBS)肌注昆明小鼠后腿股,共免疫3次,每次间隔2周,PBS组、pcDNA3.1空质粒组、pcIL-12质粒组和pcMIC8质粒组分别注射等量的PBS、pcDNA3.1空质粒、pcIL-12质粒和pcMIC8质粒,同法免疫.免疫前及初次免疫后13 d、27 d、41 d和55 d,用ELISA测小鼠血清中抗体IgG和IgG2a的表达水平.末次免疫后4周,ELISA法测各实验组小鼠脾细胞培养液上清中γ干扰素(IFN-γ)和IL-4的表达水平.末次免疫后3周,各组小鼠腹腔注射接种103弓形虫RH株速殖子,观察小鼠受攻击感染后的存活时间. 结果 Westernblotting显示,重组质粒pcMIC8能在HeLa细胞中表达,蛋白相对分子质量(Mr)约为74 000.初次免疫后55d,共免疫组小鼠血清IgG (0.51±0.028)、IgG2a (0.261±0.04)抗体水平高于pcMIC8质粒组(0

作者：赵焕阁；黄风迎；郭峻莉；谭光宏

来源：中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2013 年 31卷 4期