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目的:探讨微环境中不同浓度葡萄糖是否可通过蛋白质O位氮乙酰葡糖胺(O-GlcNAc)糖基化修饰影响人骨髓间充质干细胞增殖、周期、凋亡及衰老.方法:构建常规浓度葡萄糖(A组)(5.5mmol/L)、高浓度葡萄糖(B组)(25mmol/L)微环境模型及常糖糖基化(C组)(常糖+Thiamet-G 1.0mmol/L)、高糖糖基化(D组)(高糖+Thiamet-G 1.0mmol/L)细胞模型.人骨髓间充质干细胞在各组中培养,于第3、5、7天用WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒测定各组细胞增殖情况;于第5天用流式细胞仪检测各组细胞周期和细胞凋亡情况;于第7天用细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测各组细胞衰老情况;于第5天用Real-time PCR、Westen-bolt检测不同处理组Cyclin D1和caspase-3的表达水平.结果:第3、5、7天时细胞增殖结果显示,与A组相比,B组、C组和D组细胞增殖明显下降(P<0.05).细胞周期结果显示,B组、C组和D组相较于A组细胞周期G1期阻滞(P<0.05).细胞凋亡结果显示,与A组相比,B组、C组和D组凋亡明显增多(P<0.05).细胞衰老染色显示,与A组相比,B组、C组和D组细胞衰老明显增多(P<0.05).Real-time PCR结果显示,Cyclin D1的mRNA相对值A组、B组、C组和D组分别为1.01±0.31、0.31±0.07、0.42±0.1、0.18±0.04,其他三组显著低于A组(P<0.05);caspase-3的mRN

作者:孙超;王言;邢辉;尹晓红;姚远;刘欢;周跃

来源:中国脊柱脊髓杂志 2016 年 26卷 4期

知识库介绍

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作者:
孙超;王言;邢辉;尹晓红;姚远;刘欢;周跃
来源:
中国脊柱脊髓杂志 2016 年 26卷 4期
标签:
骨髓间充质干细胞 葡萄糖 糖基化 细胞增殖 细胞凋亡 细胞衰老 Mesenchymal stem cells Glucose Cell growth Cells apoptosis Cell senescence
目的:探讨微环境中不同浓度葡萄糖是否可通过蛋白质O位氮乙酰葡糖胺(O-GlcNAc)糖基化修饰影响人骨髓间充质干细胞增殖、周期、凋亡及衰老.方法:构建常规浓度葡萄糖(A组)(5.5mmol/L)、高浓度葡萄糖(B组)(25mmol/L)微环境模型及常糖糖基化(C组)(常糖+Thiamet-G 1.0mmol/L)、高糖糖基化(D组)(高糖+Thiamet-G 1.0mmol/L)细胞模型.人骨髓间充质干细胞在各组中培养,于第3、5、7天用WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒测定各组细胞增殖情况;于第5天用流式细胞仪检测各组细胞周期和细胞凋亡情况;于第7天用细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测各组细胞衰老情况;于第5天用Real-time PCR、Westen-bolt检测不同处理组Cyclin D1和caspase-3的表达水平.结果:第3、5、7天时细胞增殖结果显示,与A组相比,B组、C组和D组细胞增殖明显下降(P<0.05).细胞周期结果显示,B组、C组和D组相较于A组细胞周期G1期阻滞(P<0.05).细胞凋亡结果显示,与A组相比,B组、C组和D组凋亡明显增多(P<0.05).细胞衰老染色显示,与A组相比,B组、C组和D组细胞衰老明显增多(P<0.05).Real-time PCR结果显示,Cyclin D1的mRNA相对值A组、B组、C组和D组分别为1.01±0.31、0.31±0.07、0.42±0.1、0.18±0.04,其他三组显著低于A组(P<0.05);caspase-3的mRN