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目的 研究ski基因对大鼠星形胶质细胞增殖的影响及其分子机制.方法 分离3日龄Sprague-Dawley大鼠脑皮质星形胶质细胞,体外培养.合成ski和阴性对照小干扰片段.设置ski-siRNA组、阴性对照组和空白对照组,采用脂质体法将特异性针对ski基因的siRNA和阴性对照siRNA转入ski-siRNA组、阴性对照组星形胶质细胞中.Western blotting分析ski、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和Cyclin D1蛋白表达;CCK8法检测星形胶质细胞增殖活力;流式细胞仪检测细胞周期.结果 ski-siRNA组星形胶质细胞ski蛋白表达明显降低(F=38.611,P<0.01),GFAP(F=7.547,P<0.05)和Cyclin D1蛋白(F=3.901,P<0.05)表达降低;培养12 h后,ski-siRNA组增殖活力明显降低(F>30.507,P<0.01),G1期细胞比例明显增加,S期明显减少(F>48.425,P<0.01).结论 沉默ski基因可能通过下调Cyclin D1表达,抑制星形胶质细胞增殖.

作者:赵鑫;郭永强;寇江力;丁宁;周开升;南伟;张海鸿

来源:中国康复理论与实践 2017 年 23卷 9期

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作者:
赵鑫;郭永强;寇江力;丁宁;周开升;南伟;张海鸿
来源:
中国康复理论与实践 2017 年 23卷 9期
标签:
ski RNA干扰 增殖 星形胶质细胞 大鼠 ski small interfering RNA proliferation astrocyte rats
目的 研究ski基因对大鼠星形胶质细胞增殖的影响及其分子机制.方法 分离3日龄Sprague-Dawley大鼠脑皮质星形胶质细胞,体外培养.合成ski和阴性对照小干扰片段.设置ski-siRNA组、阴性对照组和空白对照组,采用脂质体法将特异性针对ski基因的siRNA和阴性对照siRNA转入ski-siRNA组、阴性对照组星形胶质细胞中.Western blotting分析ski、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和Cyclin D1蛋白表达;CCK8法检测星形胶质细胞增殖活力;流式细胞仪检测细胞周期.结果 ski-siRNA组星形胶质细胞ski蛋白表达明显降低(F=38.611,P<0.01),GFAP(F=7.547,P<0.05)和Cyclin D1蛋白(F=3.901,P<0.05)表达降低;培养12 h后,ski-siRNA组增殖活力明显降低(F>30.507,P<0.01),G1期细胞比例明显增加,S期明显减少(F>48.425,P<0.01).结论 沉默ski基因可能通过下调Cyclin D1表达,抑制星形胶质细胞增殖.