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目的 利用分子手段获得东方拟无枝酸菌HCCB10007内源环型质粒pXL100消除突变株,探究大质粒pXL100对于HCCB10007次级代谢产物的影响.方法 利用同源重组的方法将pXL100上疑似编码与质粒复制相关的基因orf37(parA)阻断,同时引入安普霉素抗性基因作为后续的筛选标记.通过EB诱导,影印培养筛选pXL 100消除突变株.比较突变株与原始菌株生长及主要次级代谢产物的变化.结果 通过筛选获得质粒消除突变株HCCB10007-pXL(-),其万古霉素和ECO-0501的产量较原始菌明显下降,分别为原菌株的1/4和1/100.结论 东方拟无枝酸菌HCCB 10007的质粒pXL 100具有调控万古霉素和ECO-0501合成的基因.

作者:仲茜;徐莉;朱丽;戈梅;钱秀萍

来源:中国抗生素杂志 2015 年 40卷 8期

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作者:
仲茜;徐莉;朱丽;戈梅;钱秀萍
来源:
中国抗生素杂志 2015 年 40卷 8期
标签:
东方拟无枝酸菌 质粒消除 pXL100 万古霉素 ECO-0501 Amycolatopsis orientali Plasmid elimination pXL100 Vancomycin ECO-0501
目的 利用分子手段获得东方拟无枝酸菌HCCB10007内源环型质粒pXL100消除突变株,探究大质粒pXL100对于HCCB10007次级代谢产物的影响.方法 利用同源重组的方法将pXL100上疑似编码与质粒复制相关的基因orf37(parA)阻断,同时引入安普霉素抗性基因作为后续的筛选标记.通过EB诱导,影印培养筛选pXL 100消除突变株.比较突变株与原始菌株生长及主要次级代谢产物的变化.结果 通过筛选获得质粒消除突变株HCCB10007-pXL(-),其万古霉素和ECO-0501的产量较原始菌明显下降,分别为原菌株的1/4和1/100.结论 东方拟无枝酸菌HCCB 10007的质粒pXL 100具有调控万古霉素和ECO-0501合成的基因.