目的 建立青霉素杂质谱HPLC分析方法,并将其转换成UPLC/UHPLC方法.方法 以青霉素混合降解溶液为样品;首先分析《中国药典》(2010年版,ChP2010)方法甲醇-缓冲盐二元流动相色谱系统的缺陷;再利用实验设计理念,以响应曲面法(response surface methodology,RSM)的中心组合设计(central composition design,CCD)对色谱系统进行优化,满意度函数法确定最优色谱条件,并优化梯度洗脱条件;最后,利用软件对HPLC方法的流速、进样体积和梯度时间进行几何缩放,并通过色谱柱的选择,将其分别转换为UPLC方法和UHPLC方法.结果 新HPLC方法:色谱柱为Capcell Pak C18MGⅡ(4.6mm×250mm,5μm),流速:1.0mL/min,进样体积:20μL;UPLC方法:色谱柱为Cortecs C18(2.1mm×100mm,1.6μm),流速:0.35mL/min,进样体积:2.0μL;UHPLC方法:Cortecs C18(4.6mm× 150mm,2.76μm),流速:0.8mL/min,进样体积:10μL.3种方法的检测波长均为225nm,柱温均为34℃;流动相A均为磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾10.6g,加水至1000mL,用磷酸调pH至3.4)-甲醇(72∶14,V/V),流动相B均为乙腈;均为梯度洗脱,但梯度洗脱表不同.结论 3个色谱系统的分离效果(出峰顺序和个数)相似.新HPLC方法可以分离出更多的降解杂质,并明显改善了青霉素峰的拖尾,缩短了分析时间.

作者：张夏；张浩杰；姚尚辰；王悦；胡昌勤

来源：中国抗生素杂志 2020 年 45卷 3期