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目的 研究红树林植物大红树内生真菌Phomopsis asparagi DHS-48发酵提取物中的化学成分及其对肝癌HepG2细胞的抑制作用,并初步探讨其作用机制.方法 通过反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质、波谱数据并结合参考文献鉴定化合物DD-38的结构;用不同浓度DD-38处理HepG2细胞,采用MTT比色法检测其对HepG2细胞增殖的抑制作用;平板克隆形成实验检测HepG2细胞克隆形成能力;细胞划痕实验观察HepG2细胞细胞的体外迁移能力;Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测β-catenin的表达水平.结果 通过1H NMR、13CNMR及MS等波谱学方法,结合相关文献数据,鉴定化合物结构为:dicerandrol A(DD-38);MTT实验显示,DD-38对HepG2细胞的增殖具有明显抑制作用,存在时间和剂量依赖性(P<0.05,P<0.01);根据细胞增殖率得出24 h时HepG2细胞的IC50为(4.8273±0.2216)pmol/L;平板克隆形成实验显示,DD-38明显降低了HepG2细胞的克隆形成能力,具有剂量依赖性(P<0.01);细胞划痕实验表明DD-38可以显著降低HepG2细胞的迁移能力(P<0.01),加药24h后,细胞迁移率从77.09%±2.16%降低到12.14%±5.32%;流式细胞术检测实验显示,DD-38可促进HepG2细胞凋亡,凋亡率存在剂量依赖性;Western blot

作者:周董董;冯婷;徐静

来源:中国抗生素杂志 2022 年 47卷 5期

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作者:
周董董;冯婷;徐静
来源:
中国抗生素杂志 2022 年 47卷 5期
标签:
DicerandrolA 肝癌细胞 细胞增殖 细胞迁移 细胞凋亡 β-catenin蛋白
目的 研究红树林植物大红树内生真菌Phomopsis asparagi DHS-48发酵提取物中的化学成分及其对肝癌HepG2细胞的抑制作用,并初步探讨其作用机制.方法 通过反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质、波谱数据并结合参考文献鉴定化合物DD-38的结构;用不同浓度DD-38处理HepG2细胞,采用MTT比色法检测其对HepG2细胞增殖的抑制作用;平板克隆形成实验检测HepG2细胞克隆形成能力;细胞划痕实验观察HepG2细胞细胞的体外迁移能力;Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测β-catenin的表达水平.结果 通过1H NMR、13CNMR及MS等波谱学方法,结合相关文献数据,鉴定化合物结构为:dicerandrol A(DD-38);MTT实验显示,DD-38对HepG2细胞的增殖具有明显抑制作用,存在时间和剂量依赖性(P<0.05,P<0.01);根据细胞增殖率得出24 h时HepG2细胞的IC50为(4.8273±0.2216)pmol/L;平板克隆形成实验显示,DD-38明显降低了HepG2细胞的克隆形成能力,具有剂量依赖性(P<0.01);细胞划痕实验表明DD-38可以显著降低HepG2细胞的迁移能力(P<0.01),加药24h后,细胞迁移率从77.09%±2.16%降低到12.14%±5.32%;流式细胞术检测实验显示,DD-38可促进HepG2细胞凋亡,凋亡率存在剂量依赖性;Western blot