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目的 探讨脑缺血再灌注后线粒体氧化应激损伤的动态变化特点.方法 利用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血模型,通过线粒体分离技术测定线粒体丙二醛、三磷酸腺苷、线粒体膜电位水平,应用Realtime PCR仪测定线粒体基因(线粒体DNA)拷贝数,分析脑缺血再灌注后不同时间点缺血周围皮质线粒体的氧化应激水平及线粒体失功能的动态变化特点.结果 ①缺血再灌注后线粒体丙二醛水平呈渐进性增高,6h为(4.61±0.83) nmol·mg-1prot,72 h达(6.94±0.96)nmol·mg-1prot,均较对照组显著升高(P<0.05);②缺血再灌注6h后mtDNA拷贝数开始下降,24h轻度回升,72h显著下降水平为对照组的62%(P<0.01);③脑缺血再灌注后6h线粒体三磷酸腺苷水平即显著下降,24 h出现短暂升高,再灌后72 h下降水平为对照组的42%(P<0.01);④荧光探针检测显示脑缺血再灌注后线粒体膜电位持续下降,再灌注后72h线粒体膜电位水平显著下降至对照组的43%(P<0.01).结论 线粒体损伤随缺血再灌注时间延长而呈渐进性加重,氧化应激损伤是构成其损伤的主要因素.缺血后脑组织线粒体存在短暂的内源性代偿修复机制,但不足以逆转氧化应激对线粒体的持续损伤.

作者:李强;翟宇;张婷;陈荣富;孙晓江

来源:中国临床神经科学 2014 年 22卷 3期

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作者:
李强;翟宇;张婷;陈荣富;孙晓江
来源:
中国临床神经科学 2014 年 22卷 3期
标签:
线粒体功能 缺血再灌注 脑 氧化应激 线粒体损伤 mitochondria function ischemia reperfusion brain oxidative stress mitochondria damage
目的 探讨脑缺血再灌注后线粒体氧化应激损伤的动态变化特点.方法 利用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血模型,通过线粒体分离技术测定线粒体丙二醛、三磷酸腺苷、线粒体膜电位水平,应用Realtime PCR仪测定线粒体基因(线粒体DNA)拷贝数,分析脑缺血再灌注后不同时间点缺血周围皮质线粒体的氧化应激水平及线粒体失功能的动态变化特点.结果 ①缺血再灌注后线粒体丙二醛水平呈渐进性增高,6h为(4.61±0.83) nmol·mg-1prot,72 h达(6.94±0.96)nmol·mg-1prot,均较对照组显著升高(P<0.05);②缺血再灌注6h后mtDNA拷贝数开始下降,24h轻度回升,72h显著下降水平为对照组的62%(P<0.01);③脑缺血再灌注后6h线粒体三磷酸腺苷水平即显著下降,24 h出现短暂升高,再灌后72 h下降水平为对照组的42%(P<0.01);④荧光探针检测显示脑缺血再灌注后线粒体膜电位持续下降,再灌注后72h线粒体膜电位水平显著下降至对照组的43%(P<0.01).结论 线粒体损伤随缺血再灌注时间延长而呈渐进性加重,氧化应激损伤是构成其损伤的主要因素.缺血后脑组织线粒体存在短暂的内源性代偿修复机制,但不足以逆转氧化应激对线粒体的持续损伤.