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目的观察增殖细胞核抗原(PCNA)基因反义脱氧寡核苷酸对人多形性胶质母细胞瘤细胞增殖的影响.方法采用人工合成的PCNA反义和正义脱氧寡核苷酸经阳离子脂质体包裹后转染人多形性胶质母细胞瘤细胞BY325.用MTT比色法检测转染后瘤细胞的生长抑制率;3H-TdR法检测细胞DNA合成速率;流式细胞仪检测细胞周期分布;RT-PCR检测PCNA mRNA表达;免疫组化方法检测PCNA蛋白表达水平.结果PCNA反义寡核苷酸可明显抑制BT325细胞的生长;明显减慢其DNA合成速率,阻滞细胞由G0/Gl期→S期,PCNA mRNA及其蛋白质表达也同时受到抑制.抑制效应在转染后12 h即出现,24 h达到高峰,48 h后逐渐减弱.抑制作用随反义寡核苷酸浓度的升高而增强,0.8μM PCNA反义寡核苷酸的细胞生长抑制率达84.6

作者:李美华;朱贤立

来源:中国临床神经外科杂志 2002 年 7卷 2期

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作者:
李美华;朱贤立
来源:
中国临床神经外科杂志 2002 年 7卷 2期
标签:
增殖细胞核抗原 神经胶质瘤 反义寡核苷酸 细胞增殖 基因治疗
目的观察增殖细胞核抗原(PCNA)基因反义脱氧寡核苷酸对人多形性胶质母细胞瘤细胞增殖的影响.方法采用人工合成的PCNA反义和正义脱氧寡核苷酸经阳离子脂质体包裹后转染人多形性胶质母细胞瘤细胞BY325.用MTT比色法检测转染后瘤细胞的生长抑制率;3H-TdR法检测细胞DNA合成速率;流式细胞仪检测细胞周期分布;RT-PCR检测PCNA mRNA表达;免疫组化方法检测PCNA蛋白表达水平.结果PCNA反义寡核苷酸可明显抑制BT325细胞的生长;明显减慢其DNA合成速率,阻滞细胞由G0/Gl期→S期,PCNA mRNA及其蛋白质表达也同时受到抑制.抑制效应在转染后12 h即出现,24 h达到高峰,48 h后逐渐减弱.抑制作用随反义寡核苷酸浓度的升高而增强,0.8μM PCNA反义寡核苷酸的细胞生长抑制率达84.6