目的 探讨siRNA沉默CD99基因表达对髓母细胞瘤细胞系DAOY细胞增殖和凋亡的影响.方法 利用CD99 siRNA转染髓母细胞瘤DAOY细胞,细胞分为沉默1组(转染CD99 siRNA-1#)、沉默2组(转染CD99 siRNA-2#)、对照组(转染siRNA阴性对照),采用实时荧光定量PCR和免疫印迹法检测沉默效果.利用CCK-8细胞增殖实验、平板克隆形成实验检测细胞增殖能力,采用流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡.结果 沉默1组和沉默2组CD99蛋白和mRNA表达水平均明显低于对照组(P＜0.05),而沉默2组又明显低于沉默1组(P＜0.01);因此,选用CD99 siRNA-2#进行后续实验.沉默CD99基因表达后3、4、5d,沉默2组细胞增殖水平较对照组明显降低(P＜0.05);平板克隆形成实验结果显示,沉默2组细胞克隆集落数明显减少(P＜0.05).沉默2组G0/G1期细胞百分比较对照组明显增加(P＜0.05),S期细胞、G2/M期细胞百分比明显低于对照组(P＜0.05).沉默2组细胞早期凋亡率(8.75％±1.47％)显著高于对照组(3.42％±1.21％;P＜0.05).结论 CD99基因在髓母细胞瘤DAOY细胞的增殖和凋亡中发挥重要作用,推测CD99基因可能成为治疗髓母细胞瘤的一个新靶点.
作者：张鹏；梁励玮；陈昕薇；任勇
来源：中国临床神经外科杂志 2019 年 24卷 10期
