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目的:建立敏感的微孔板方法检测alpha-葡萄糖苷酶抑制活性,以进行抑制剂体外高通量筛选.方法:调整酶和底物适当配比,通过标准曲线、波长扫描、动力学分析以及最佳反应条件的研究,用阿卡波糖验证所建方法.结果:确定反应步骤,96孔板,160 μl体系含 2.5 mmol·L-1 PNPG和 0.2 U·ml-1 alpha-葡萄糖苷酶,37 ℃,pH 7.0 反应15 min,400 nm检测,此法正确、可靠.结论:本文所述用小体积样品筛选得到大量抑制剂的方法,利于从天然产物中开发改善餐后血糖的糖尿病及其并发症治疗药物.

作者:李婷;张小东;宋聿文;刘建文

来源:中国临床药理学与治疗学 2005 年 10卷 10期

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作者:
李婷;张小东;宋聿文;刘建文
来源:
中国临床药理学与治疗学 2005 年 10卷 10期
标签:
阿卡波糖 alpha-葡萄糖苷酶抑制剂 药物筛选 微孔板方法 餐后血糖 acarbose alpha-glucosidase inhibitors drug screening microplate assay postprandial hyperglycemia
目的:建立敏感的微孔板方法检测alpha-葡萄糖苷酶抑制活性,以进行抑制剂体外高通量筛选.方法:调整酶和底物适当配比,通过标准曲线、波长扫描、动力学分析以及最佳反应条件的研究,用阿卡波糖验证所建方法.结果:确定反应步骤,96孔板,160 μl体系含 2.5 mmol·L-1 PNPG和 0.2 U·ml-1 alpha-葡萄糖苷酶,37 ℃,pH 7.0 反应15 min,400 nm检测,此法正确、可靠.结论:本文所述用小体积样品筛选得到大量抑制剂的方法,利于从天然产物中开发改善餐后血糖的糖尿病及其并发症治疗药物.