目的:利用小分子干扰RNA(siRNA)技术抑制人直肠癌Colo320细胞c-Myc基因的表达.为研究c-Myc基因在人直肠癌Colo320细胞中的作用提供一个新的方法.方法:设计人直肠癌Colo320细胞基因特异性小分子干扰RNA,用体外转录方法合成人直肠癌Colo320细胞基因的小分子干扰RNA并转染人直肠癌Colo320细胞,培养48～96 h 后,收集细胞RNA应用实时荧光定量RT-PCR方法检测转染细胞中c-Myc基因mRNA水平变化,Western blot检测C-MYC蛋白的表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT法)和集落形成实验检测细胞增殖活性.结果:转染siRNA后,与对照组相比,实验组pGensil-c-Myc-1-4的c-Myc基因mRNA水平明显降低,MTT法和集落形成实验表明实验组的增殖速率明显低于对照组的增殖速率.结论:在人直肠癌Colo320细胞中存在RNA干扰的机制,特异性siRNA能够有效的抑制c-Myc基因的表达,为研究c-Myc基因在肿瘤细胞中的调节途径提供了一个新的方法.
作者：黄浩；凃欣；余南才；刘倩；易艳东；马威
来源：中国临床药理学与治疗学 2006 年 11卷 11期
