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目的:探讨小干扰RNA沉默Bcl-XL对肺腺癌耐药细胞株A549/DDP药物敏感性的影响及其凋亡机制.方法:将Bcl-XL siRNA质粒载体转染至A549/DDP细胞,MTT、流式细胞仪检测细胞药物敏感性的改变;丫啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法检测细胞凋亡;RT-PCR检测Bcl-XL mRNA水平;Western-Blot检测Bcl-XL、caspase-3蛋白表达的变化.结果:分别用 0.2、2、20、200μg/mL顺铂处理细胞 48 h,MTT显示转染Bcl-XL siRNA细胞组A570吸光度值较阴性siRNA细胞组和未转染对照组明显降低,细胞生长抑制率明显增高;用 20 μg/mL顺铂处理细胞 48 h,流式细胞仪检测,转染Bcl-XL siRNA组凋亡率较转染阴性siRNA组和未转染组增加;AO/EB染色显示转染Bcl-XL siRNA的细胞较转染阴性siRNA及未转染者凋亡率增加;转染Bcl-XL siRNA降低了Bcl-XL mRNA和蛋白水平,升高了caspase-3活性形式蛋白表达.结论:Bcl-XL siRNA特异性下调A549/DDP细胞Bcl-XL的表达,活化caspase-3 蛋白,促进A549/DDP细胞凋亡,增强该肺腺瘤细胞对顺铂的敏感性.

作者:黄泽香;刘丽娟;姚淑琼;雷小勇;朱炳阳;唐圣松;廖端芳

来源:中国临床药理学与治疗学 2007 年 12卷 1期

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作者:
黄泽香;刘丽娟;姚淑琼;雷小勇;朱炳阳;唐圣松;廖端芳
来源:
中国临床药理学与治疗学 2007 年 12卷 1期
标签:
小干扰RNA Bcl-XL A549/DDP细胞 凋亡 顺铂
目的:探讨小干扰RNA沉默Bcl-XL对肺腺癌耐药细胞株A549/DDP药物敏感性的影响及其凋亡机制.方法:将Bcl-XL siRNA质粒载体转染至A549/DDP细胞,MTT、流式细胞仪检测细胞药物敏感性的改变;丫啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法检测细胞凋亡;RT-PCR检测Bcl-XL mRNA水平;Western-Blot检测Bcl-XL、caspase-3蛋白表达的变化.结果:分别用 0.2、2、20、200μg/mL顺铂处理细胞 48 h,MTT显示转染Bcl-XL siRNA细胞组A570吸光度值较阴性siRNA细胞组和未转染对照组明显降低,细胞生长抑制率明显增高;用 20 μg/mL顺铂处理细胞 48 h,流式细胞仪检测,转染Bcl-XL siRNA组凋亡率较转染阴性siRNA组和未转染组增加;AO/EB染色显示转染Bcl-XL siRNA的细胞较转染阴性siRNA及未转染者凋亡率增加;转染Bcl-XL siRNA降低了Bcl-XL mRNA和蛋白水平,升高了caspase-3活性形式蛋白表达.结论:Bcl-XL siRNA特异性下调A549/DDP细胞Bcl-XL的表达,活化caspase-3 蛋白,促进A549/DDP细胞凋亡,增强该肺腺瘤细胞对顺铂的敏感性.