目的:建立k-ras基因突变的焦磷酸测序方法,并分析该基因在结直肠癌中的突变率.方法:制备10份卫生部临床检验中心2013年全国k-ras基因突变检测室间质评模板DNA,对焦磷酸测序技术检测k-ras基因突变方法进行验证;制备230例结直肠癌标本gDNA,应用PyroMark Q24焦磷酸测序仪进行k-ras基因的焦磷酸测序.结果:建立了k-ras基因突变的焦磷酸测序新方法,检测正确率100％;230例结直肠癌标本中共检出基因突变型33例,总突变率14.34％ (33/230),其中12号密码子上34G＞T的突变率为1.74％ (4/230),35G ＞A的突变率为5.22％ (12/230),35G＞T的突变率为3.04％ (7/230),37G＞A的突变率为0.43％ (1/230),13号密码子上38G＞A的突变率为3.91％ (9/230).结论:k-ras基因突变的焦磷酸测序新方法具有快速、准确和高通量的优点,适合于在科研和临床基因扩增检验中推广.
作者：周霞辉；吴成就；肖乐东；孙立贤；曹忠
来源：中国临床药理学与治疗学 2015 年 20卷 4期
