目的:建立卵巢癌细胞株与紫杉醇耐药卵巢癌细胞亚株的差异蛋白表达图谱,寻找对紫杉醇药物耐受的相关蛋白.方法:以人卵巢浆液性囊腺癌细胞株(SKOV3)和对紫杉醇稳定耐药卵巢浆液性囊腺癌细胞亚株(SKOV3-TR30)为研究对象,应用双向电泳技术建立SKOV3与SKOV3-TR30的蛋白质差异表达图谱,并对图谱进行质谱分析.然后应用蛋白免疫印迹和免疫细胞化学方法对其中3个有差异的蛋白进行定量和定位检测.结果:(1)经过组内与组间3次重复,发现每次实验均有相似变化的差异点23个.其中与SKOV3细胞株相比,在SKOV3-TR30细胞株表达上调大于3倍的蛋白质点有16个(P＜0.05),表达下调大于3倍的蛋白质点有7个(P＜0.05).(2)通过质谱分析和数据库搜索,其中7个蛋白点得到初步鉴定,分别为可溶性抗药性相关钙结合蛋白(Sorcin)、组织蛋白酶B前体(CathepsinB)、调宁蛋白3、热休克蛋白27(HSP27)、波形纤维蛋白、尼克酰胺乙酰乙酸水解酶和血红蛋白β链.(3)蛋白免疫印迹结果显示,Sorcin、CathepsinB及HSP27在SKOV3-TR30细胞中的表达显著高于SKOV3细胞株(P＜0.05).免疫细胞化学的结果表明,SKOV3及SKOV3-TR30均可检测到Sorcin、Cathepsin B及HSP27阳性表达的细胞,并且3个蛋白均分布在细胞浆内,以核周最为明显.结论:低浓度紫杉醇诱导的上皮性卵巢癌
作者：傅君；叶大风；傅云峰
来源：中国临床药理学与治疗学 2015 年 20卷 5期
