目的:通过体外细胞实验,研究半胱氨酸(cysteine,CYS)加剧棕榈酸(palmitate,PAL)诱导肝细胞死亡的作用机制.方法:以人肝细胞株HepG2为细胞模型,采用LDH、MTF技术以及Hoechst染色法检测细胞增殖活性,通过酶化学方法检测细胞内谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,应用DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,利用Western blot技术检测细胞内质网应激相关蛋白C/EBP同源转录因子(C/EBPhomologous transcription factor,CHOP),GRP-78以及磷酸化的c-Jun氨基末端激酶(phosphorylated c-jun N-terminal kinase,p-JNK)的表达量.结果:(1) PAL可以显著抑制HepG2细胞的增殖活性.(2) PAL提高HepG2细胞内的GSH水平,但不影响MDA和ROS水平.(3) CYS显著加剧PAL诱导肝细胞死亡的作用.(4) CYS/PAL协同作用不影响细胞内MDA和ROS水平.(5) CYS/PAL协同作用可显著提高肝细胞内质网应激相关蛋白GRP-78、CHOP和p-JNK的表达.(6)抑制JNK通路可抑制PAL诱导的细胞死亡.结论:CYS通过激活JNK通路导致内质网应激加强,从而加剧PAL诱导细胞死亡,参与NASH发病机制.

作者：刘庆生；丁滨；窦晓兵；潘然；张福利；丁蕾；桑怡

来源：中国临床药理学与治疗学 2016 年 21卷 4期