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目的 研究微小RNA-195(miR-195)调节转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)活化与Smad7表达的关系.方法 体外培养HSC-T6,用5 ng·mL-1 TGF-β1作为刺激因子,模拟大鼠肝纤维化模型.将细胞分为6组:对照组、模型组(TGF-β1组)、miR-195 mimic实验组、miR-195 mimic NC实验组、miR-195 inhibitor实验组及miR-195 inhibitor NC实验组.分别用5 ng·mL-1 TGF-β1处理HSC-T6细胞24,48,72 h后,以实时荧光定量PCR法检测miR-195、Smad7及α-SMA mRNA表达,以免疫印迹法检测Smad7蛋白表达.结果 在TGF-β1诱导下,miR-195的表达随时间逐渐升高、α-SMA表达逐步上调而Smad7表达呈降低趋势,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.01;P<0.05).与模型组比较,miR-195 mimic能促进TGF-β1诱导的HSC-T6活化,升高miR-195、α-SMA mRNA表达而降低Smad7mRNA和蛋白表达,差异均有统计学意义(均P<0.01).同时,miR-195inhibitor可逆转TGF-β1诱导的HSC-T6活化,降低miR-195、α-SMA mRNA表达而升高Smad7 mRNA和蛋白表达,差异均有统计学意义(均P<0.01).结论 miR-195促进TGF-β1诱导的HSC-T6活化与Smad7表达相关.

作者:马玉桃;何阳;孟佩佩;左珊如;郭韧;刘世坤

来源:中国临床药理学杂志 2017 年 33卷 20期

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作者:
马玉桃;何阳;孟佩佩;左珊如;郭韧;刘世坤
来源:
中国临床药理学杂志 2017 年 33卷 20期
标签:
微小RNA-195 Smad7 转化生长因子-β1 大鼠肝星状细胞 肝纤维化 miRNA-195 Smad7 transforming growth factor-β1 rat hepatic stellate cell hepatic fibrosis
目的 研究微小RNA-195(miR-195)调节转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)活化与Smad7表达的关系.方法 体外培养HSC-T6,用5 ng·mL-1 TGF-β1作为刺激因子,模拟大鼠肝纤维化模型.将细胞分为6组:对照组、模型组(TGF-β1组)、miR-195 mimic实验组、miR-195 mimic NC实验组、miR-195 inhibitor实验组及miR-195 inhibitor NC实验组.分别用5 ng·mL-1 TGF-β1处理HSC-T6细胞24,48,72 h后,以实时荧光定量PCR法检测miR-195、Smad7及α-SMA mRNA表达,以免疫印迹法检测Smad7蛋白表达.结果 在TGF-β1诱导下,miR-195的表达随时间逐渐升高、α-SMA表达逐步上调而Smad7表达呈降低趋势,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.01;P<0.05).与模型组比较,miR-195 mimic能促进TGF-β1诱导的HSC-T6活化,升高miR-195、α-SMA mRNA表达而降低Smad7mRNA和蛋白表达,差异均有统计学意义(均P<0.01).同时,miR-195inhibitor可逆转TGF-β1诱导的HSC-T6活化,降低miR-195、α-SMA mRNA表达而升高Smad7 mRNA和蛋白表达,差异均有统计学意义(均P<0.01).结论 miR-195促进TGF-β1诱导的HSC-T6活化与Smad7表达相关.