目的 研究自噬在大鼠胃Cajal间质细胞(ICCs)活性及钙离子稳态过程中的影响.方法 选取SPF级健康大鼠30只,随机分为自噬诱导剂雷帕霉素组、自噬抑制剂羟氯喹及对照组,经灌胃构建不同自噬水平的动物模型,酶解法分离大鼠胃ICCs并进行c-kit特异性免疫荧光鉴定及逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测LC3B表达水平,判断自噬模型是否成功构建.分离的ICCs体外培养并给予自噬诱导剂及抑制剂,用细胞计数法8(CCK8)法检测雷帕霉素组、羟氯喹组及对照组中ICCs的细胞活性,用Fluo-4/AM荧光染色分析雷帕霉素组、羟氯喹组及对照组中细胞内的钙离子浓度.结果 成功分离并鉴定ICCs.雷帕霉素组、羟氯喹组ICCs的LC3 B水平分别为4.07±0.45,0.27±0.05,与对照组(1.00±0.06)相比,差异有统计学意义(P<0.05).雷帕霉素组ICCs细胞活性和胞内钙离子浓度分别为(44.32±5.58)％,11.68±1.14,羟氯喹组分别为(154.00±4.86)％,0.84±0.02,与对照组的(100.00±5.73)％,2.17±0.11相比,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 自噬诱导大鼠肠道内ICCs的细胞活性减少及功能异常,自噬激活的ICCs胞内游离钙离子升高,为靶向调控ICCs所致的胃肠动力障碍提供了新的靶点.
作者：邓秋林；李春花；刘丽兵；汤国辉；邢佼涛；范超；刘亚
来源：中国临床药理学杂志 2019 年 35卷 18期
