目的 探究长链非编码RNA(LncRNA) H19对肝细胞癌(HCC)肿瘤干细胞特性及吉西他滨(GEM)耐药的影响.方法 用浓度梯度递增法建立HepG2GEM抵抗细胞株(HepG2-GR)及对照细胞株(HepG2-C),用慢病毒转染法将表达针对H19 siRNA的干扰载体及空白载体转染至HepG2-GR细胞中作为siRNA干扰H19的HepG2-GR细胞株(HepG2-siGR)及相应对照抵抗细胞株(HepG2-GRC).用CCK-8实验检测细胞GEM半抑制浓度(IC50),用实时荧光定量聚合酶链反应检测H19 mRNA表达水平,用免疫印迹法检测细胞CD90、CD44及CD133蛋白表达水平.结果 HepG2-C细胞和HepG2-GR细胞的GEM IC50分别为(1.21 ±0.17)和(11.36±2.09) μg·mL-1,H19 mRNA表达水平分别为(0.089±0.006)和(0.243±0.019),CD90蛋白分别为(0.354±0.036)和(0.681±0.057),CD44蛋白分别为(0.136±0.017)和(0.249±0.028),CD133蛋白分别为(0.530±0.060)和(0.914 ±0.137),差异均有统计学意义(均P<0.01).HepG2-GRC细胞和HepG2-siGR细胞的GEM IC50分别为(10.85±2.19)和(6.36±1.54) μg·mL-1,H19 mRNA表达水平分别为(0.220±0.023)和(0.065±0.007),CD90蛋白分别为(0.735±0.066)和(0.592±0.053),CD44蛋白分别为(0.252±0.031)和(0.149±0.013),CD133蛋白分别为(0.954±0.118)和(0.723±0.072
作者:杨超文;余子建
来源:中国临床药理学杂志 2019 年 35卷 19期