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目的:探讨抗衰老酶1(sirtuin 1,SIRT1)在七氟醚(sevoflurane,Sev)联合一氧化二氮(N2O)吸入麻醉导致的原代海马神经元细胞凋亡中的作用.方法:原代海马神经元予以1.3%Sev联合50%N2 O吸入麻醉(对照组给予50%O2)处理2 h,或吸入麻醉前分别予以SIRT1拮抗剂sirtinol(50μmol/L)、salermide(50μmol/L)或激动剂resveratrol(100μmol/L)处理24 h.24 h后收集细胞,采用蛋白质印迹法检测Bax、剪切型半胱氨酸蛋白酶3(cleaved caspase-3,c-caspase-3)、剪切型聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶[cleaved poly(ADP-ribose)polymerase,c-PARP]、磷酸化组蛋白H2A家族成员X(phosphorylated H2A histone family member X,γ-H2AX)、SIRT1和乙酰化p53[acetylated p53(lysine 381),acetyl-p53]蛋白水平,采用免疫荧光染色法检测c-caspase-3、SIRT1和acetyl-p53蛋白的分布及表达情况.结果:Sev联合N2 O吸入麻醉显著上调原代海马神经元中促凋亡蛋白Bax、c-caspase-3、c-PARP及DNA损伤相关指标γ-H2AX的表达水平(P<0.05);同时麻醉组SIRT1蛋白表达水平也显著升高,而acetyl-p53表达水平显著降低(P<0.05).吸入麻醉处理前给予SIRT1拮抗剂sirtinol或salermide预处理可抑制吸入麻醉引起的SIRT1蛋白表达上调,但增加了促凋亡蛋白Bax、c-caspase-3

作者:熊万霞;赵曦宁;王颖

来源:中国临床医学 2019 年 26卷 6期

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作者:
熊万霞;赵曦宁;王颖
来源:
中国临床医学 2019 年 26卷 6期
标签:
吸入麻醉 抗衰老酶1 去乙酰化p53 海马神经元 细胞凋亡 神经保护
目的:探讨抗衰老酶1(sirtuin 1,SIRT1)在七氟醚(sevoflurane,Sev)联合一氧化二氮(N2O)吸入麻醉导致的原代海马神经元细胞凋亡中的作用.方法:原代海马神经元予以1.3%Sev联合50%N2 O吸入麻醉(对照组给予50%O2)处理2 h,或吸入麻醉前分别予以SIRT1拮抗剂sirtinol(50μmol/L)、salermide(50μmol/L)或激动剂resveratrol(100μmol/L)处理24 h.24 h后收集细胞,采用蛋白质印迹法检测Bax、剪切型半胱氨酸蛋白酶3(cleaved caspase-3,c-caspase-3)、剪切型聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶[cleaved poly(ADP-ribose)polymerase,c-PARP]、磷酸化组蛋白H2A家族成员X(phosphorylated H2A histone family member X,γ-H2AX)、SIRT1和乙酰化p53[acetylated p53(lysine 381),acetyl-p53]蛋白水平,采用免疫荧光染色法检测c-caspase-3、SIRT1和acetyl-p53蛋白的分布及表达情况.结果:Sev联合N2 O吸入麻醉显著上调原代海马神经元中促凋亡蛋白Bax、c-caspase-3、c-PARP及DNA损伤相关指标γ-H2AX的表达水平(P<0.05);同时麻醉组SIRT1蛋白表达水平也显著升高,而acetyl-p53表达水平显著降低(P<0.05).吸入麻醉处理前给予SIRT1拮抗剂sirtinol或salermide预处理可抑制吸入麻醉引起的SIRT1蛋白表达上调,但增加了促凋亡蛋白Bax、c-caspase-3