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目的 结合骨髓间充质干细胞与血管内皮生长因子(VEGF)的优点,探讨VEGF对其体外诱导分化的作用.为缺血性疾病的治疗提供新思路.方法 成人新鲜骨髓,Percoll梯度分离法培养,单克隆培养法分离传代扩增骨髓基质细胞(MSCs).在大肠杆菌DH5α中扩增和提取,纯化、克隆pcDNA3.0-VEGF165质粒.脂质体法转染MSCs.流式细胞术检测诱导前后MSCs免疫表型变化.一抗VEGF和CD31(1∶50),FITC标记的VEGF二抗和cy3标记的CD31二抗与细胞共同孵育,甘油封片,在激光扫描共聚焦显微镜下观察细胞染色情况.结果 转染前表达CD44(75.86

作者:杜建时;赵晴;张英丽;陈珂

来源:中国老年学杂志 2007 年 27卷 13期

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作者:
杜建时;赵晴;张英丽;陈珂
来源:
中国老年学杂志 2007 年 27卷 13期
标签:
骨髓间充质干细胞 血管内皮生长因子(VEGF) 基因转染
目的 结合骨髓间充质干细胞与血管内皮生长因子(VEGF)的优点,探讨VEGF对其体外诱导分化的作用.为缺血性疾病的治疗提供新思路.方法 成人新鲜骨髓,Percoll梯度分离法培养,单克隆培养法分离传代扩增骨髓基质细胞(MSCs).在大肠杆菌DH5α中扩增和提取,纯化、克隆pcDNA3.0-VEGF165质粒.脂质体法转染MSCs.流式细胞术检测诱导前后MSCs免疫表型变化.一抗VEGF和CD31(1∶50),FITC标记的VEGF二抗和cy3标记的CD31二抗与细胞共同孵育,甘油封片,在激光扫描共聚焦显微镜下观察细胞染色情况.结果 转染前表达CD44(75.86