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目的 构建针对人结肠癌细胞系Lovo的高效率沉默Survivin的shRNA表达载体.方法 合成特异性干扰Survivin的小发卡RNA(shRNA)片段,并与pGenesil2 载体连接,构建Survivin干扰载体(pGenesil2-Survivin shRNA).利用脂质体将其转染Lovo细胞,分为正常细胞对照组和3个shRNA干扰组(pGenesil2-Survivin1、2及3),应用荧光显微镜对转染效果进行评价,应用Western印迹和免疫细胞化学法分析转染后Lovo中Survivin的蛋白表达水平.结果 插入片段测序结果与合成shRNA结果一致;转染效率可达70

作者:史美龙

来源:中国老年学杂志 2009 年 29卷 11期

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作者:
史美龙
来源:
中国老年学杂志 2009 年 29卷 11期
标签:
RNA干扰 生存素 结肠癌 shRNA
目的 构建针对人结肠癌细胞系Lovo的高效率沉默Survivin的shRNA表达载体.方法 合成特异性干扰Survivin的小发卡RNA(shRNA)片段,并与pGenesil2 载体连接,构建Survivin干扰载体(pGenesil2-Survivin shRNA).利用脂质体将其转染Lovo细胞,分为正常细胞对照组和3个shRNA干扰组(pGenesil2-Survivin1、2及3),应用荧光显微镜对转染效果进行评价,应用Western印迹和免疫细胞化学法分析转染后Lovo中Survivin的蛋白表达水平.结果 插入片段测序结果与合成shRNA结果一致;转染效率可达70