目的 通过体外培养骨关节炎(OA)软骨细胞体系,了解氨基葡萄糖对白细胞介素(IL)-1β诱导OA软骨细胞蛋白聚糖分解代谢的影响.方法 软骨细胞采自OA患者,采用分阶段酶消化法体外原代培养人软骨细胞.在培养液中加入IL-1β诱导剂,设立兔血清对照组、IL-1β实验对照组和氨基葡萄糖加药实验组；给予实验兔以氨基葡萄糖等效剂量灌胃后,抽取含药血清培养细胞.采用3种方法了解蛋白聚糖的代谢水平:①用二甲基亚甲蓝分光光度法(DMMB法)检测细胞中及培养液中的糖胺多糖(GAG)含量；②酶联免疫吸附法检测培养液中蛋白聚糖的不同代谢片段(Mab-3 B3和5D4)；③反转录聚合酶链反应(RT-PCR)半定量法检测软骨细胞的蛋白聚糖、可聚蛋白聚糖酶-1和可聚蛋白聚糖酶-2mRNA的表达水平.结果 各浓度氨基葡萄糖含药血清组体外培养的软骨细胞释放入培养液中GAG百分比均值明显低于对照组(P＜0.01),随氨基葡萄糖浓度的增加,释放入培养液中GAG的百分比逐渐降低；3B3含量的均值较对照组相比明显增高(P＜0.01),与氨基葡萄糖浓度呈正相关,释放入培养液中5D4含量的均值则明显降低(P＜0.05),与氨基葡萄糖浓度呈负相关；氨基葡萄糖可以增加OA患者软骨细胞和IL-1β诱导的OA患者软骨细胞蛋白聚糖mRNA表达,减低可聚蛋白聚糖酶-1、可聚蛋白聚糖酶-2mRNA
作者：杨建辉；吕建国；王辉；申晓东
来源：中国老年学杂志 2013 年 33卷 15期
