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目的 观察肝细胞生长因子(HGF)在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)促进原代星状细胞(HSCs)凋亡中的作用及机制.方法 复苏、传代SD大鼠原代HSCs,细胞增殖明显时用于实验.分为4组:①HSCs空白对照组;②HGF组;③TRAIL组;④HGF组+TRAIL组.各实验组细胞培养24 h、48 h.采用倒置相差显微镜观察细胞形态,MTT比色法检测外源性HGF及TRAIL分别对肝星状细胞增殖抑制率的影响.流式细胞仪Annexin-V-FITC/PI双染法检测HSCs凋亡以及使用Western印迹法检测HSCs表面DR5蛋白的表达.结果 MTT法结果显示HGF及TRAIL分别在50 ~ 200 ng/ml、0.5~ 1.5 μg/ml浓度下对HSCs增殖抑制率无影响,TRAIL在2μg/ml浓度下对HSCs有抑制作用;24、48 h增殖抑制率分别为(8.03±1.2)%、(24.6±0.8)%(P<0.01).流式细胞仪检测各组HSCs的凋亡结果示:HGF+ TRAIL组24、48 h凋亡率及DR5蛋白相对表达量明显高于空白对照组、TRAIL组及HGF组(均P<0.01).结论 HGF能促进TRAIL诱导HSCs的凋亡并抑制其增殖,可能与HGF上调活化HSCs表面DR5蛋白表达有关.

作者:张君红;姜海行;覃山羽;孟云超;宁琳;杨文;沈妍华

来源:中国老年学杂志 2013 年 33卷 23期

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作者:
张君红;姜海行;覃山羽;孟云超;宁琳;杨文;沈妍华
来源:
中国老年学杂志 2013 年 33卷 23期
标签:
肝星状细胞 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 肝细胞生长因子 凋亡 死亡受体-5 Hepatic satellite cells Tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand apotosis Hepatocyte growth factor Apotosis Death receptor-5
目的 观察肝细胞生长因子(HGF)在肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)促进原代星状细胞(HSCs)凋亡中的作用及机制.方法 复苏、传代SD大鼠原代HSCs,细胞增殖明显时用于实验.分为4组:①HSCs空白对照组;②HGF组;③TRAIL组;④HGF组+TRAIL组.各实验组细胞培养24 h、48 h.采用倒置相差显微镜观察细胞形态,MTT比色法检测外源性HGF及TRAIL分别对肝星状细胞增殖抑制率的影响.流式细胞仪Annexin-V-FITC/PI双染法检测HSCs凋亡以及使用Western印迹法检测HSCs表面DR5蛋白的表达.结果 MTT法结果显示HGF及TRAIL分别在50 ~ 200 ng/ml、0.5~ 1.5 μg/ml浓度下对HSCs增殖抑制率无影响,TRAIL在2μg/ml浓度下对HSCs有抑制作用;24、48 h增殖抑制率分别为(8.03±1.2)%、(24.6±0.8)%(P<0.01).流式细胞仪检测各组HSCs的凋亡结果示:HGF+ TRAIL组24、48 h凋亡率及DR5蛋白相对表达量明显高于空白对照组、TRAIL组及HGF组(均P<0.01).结论 HGF能促进TRAIL诱导HSCs的凋亡并抑制其增殖,可能与HGF上调活化HSCs表面DR5蛋白表达有关.