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目的:探讨蛋白酶体抑制剂(MG132)与顺铂(DDP)联合诱导肺癌 A549细胞凋亡的机制及作用。方法采用四甲基偶氮唑盐( MTT)法检测不同浓度MG132、DDP对肺癌A549细胞的最适作用时间以及抑制率;通过 Hochest33342染色法检测细胞形态变化;应用流式细胞术( FCW)检测 MG132、DDP 及两药联合作用于肺癌 A549细胞的凋亡率;采用 Western 印迹检测药物干预前后细胞中促凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶(caspase)9、核转录因子(NF-κB)的表达情况。结果 MTT 结果显示 MG132、DDP 能有效抑制细胞的增殖,呈浓度及时间依赖性;FCW 结果显示MG132与DDP联合用药组作用于肺癌A549细胞凋亡率为(68.27±0.31)%,与MG132(22.13±0.36)%、DDP(25.76±0.25)%单用药组相比,细胞凋亡率明显提高(P<0.05)。 Western印迹结果显示,与单用药组相比较,联合用药组凋亡相关蛋白caspase9表达明显增强,NF-κB表达显著减少。结论MG132与DDP联合应用可明显提高细胞凋亡率,其机制可能是通过提高促凋亡蛋白caspase9的表达,并降低细胞NF-κB的表达而实现的。

作者:韩玉杰;赵松;杨洋;刘东雷;吴恺;潘丽红;朱砾

来源:中国老年学杂志 2014 年 9期

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作者:
韩玉杰;赵松;杨洋;刘东雷;吴恺;潘丽红;朱砾
来源:
中国老年学杂志 2014 年 9期
标签:
蛋白酶体抑制剂 顺铂 肺癌A549细胞 细胞凋亡 核转录因子
目的:探讨蛋白酶体抑制剂(MG132)与顺铂(DDP)联合诱导肺癌 A549细胞凋亡的机制及作用。方法采用四甲基偶氮唑盐( MTT)法检测不同浓度MG132、DDP对肺癌A549细胞的最适作用时间以及抑制率;通过 Hochest33342染色法检测细胞形态变化;应用流式细胞术( FCW)检测 MG132、DDP 及两药联合作用于肺癌 A549细胞的凋亡率;采用 Western 印迹检测药物干预前后细胞中促凋亡蛋白半胱氨酸蛋白酶(caspase)9、核转录因子(NF-κB)的表达情况。结果 MTT 结果显示 MG132、DDP 能有效抑制细胞的增殖,呈浓度及时间依赖性;FCW 结果显示MG132与DDP联合用药组作用于肺癌A549细胞凋亡率为(68.27±0.31)%,与MG132(22.13±0.36)%、DDP(25.76±0.25)%单用药组相比,细胞凋亡率明显提高(P<0.05)。 Western印迹结果显示,与单用药组相比较,联合用药组凋亡相关蛋白caspase9表达明显增强,NF-κB表达显著减少。结论MG132与DDP联合应用可明显提高细胞凋亡率,其机制可能是通过提高促凋亡蛋白caspase9的表达,并降低细胞NF-κB的表达而实现的。