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目的:通过转基因方式建立绿色荧光示踪的胰岛β细胞斑马鱼,使用化学遗传学方法建立可调控胰岛β细胞破坏的斑马鱼模型。方法原位杂交、Western印迹技术、免疫荧光证实化学法破坏的可示踪绿色荧光蛋白标记的胰岛β细胞的转基因斑马鱼模型。结果筛选获得转基因胰岛β细胞斑马鱼系,甲硝唑化学方法破坏胰岛β细胞,原位杂交试验证实荧光蛋白与胰岛β细胞共定位,Western印迹技术进一步证实斑马鱼胰岛β细胞的破坏效果,免疫荧光试验印证绿色荧光蛋白明显降低同时,细胞的凋亡明显增多。结论建立了化学法破坏的可示踪绿色荧光蛋白标记的胰岛β细胞的转基因斑马鱼模型,实现在整体动物水平上研究胰岛β细胞。

作者:夏铭;潘雪

来源:中国老年学杂志 2014 年 10期

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作者:
夏铭;潘雪
来源:
中国老年学杂志 2014 年 10期
标签:
转基因斑马鱼 胰岛β细胞 原位杂交 免疫印迹 免疫荧光
目的:通过转基因方式建立绿色荧光示踪的胰岛β细胞斑马鱼,使用化学遗传学方法建立可调控胰岛β细胞破坏的斑马鱼模型。方法原位杂交、Western印迹技术、免疫荧光证实化学法破坏的可示踪绿色荧光蛋白标记的胰岛β细胞的转基因斑马鱼模型。结果筛选获得转基因胰岛β细胞斑马鱼系,甲硝唑化学方法破坏胰岛β细胞,原位杂交试验证实荧光蛋白与胰岛β细胞共定位,Western印迹技术进一步证实斑马鱼胰岛β细胞的破坏效果,免疫荧光试验印证绿色荧光蛋白明显降低同时,细胞的凋亡明显增多。结论建立了化学法破坏的可示踪绿色荧光蛋白标记的胰岛β细胞的转基因斑马鱼模型,实现在整体动物水平上研究胰岛β细胞。