目的:利用RNA干扰技术构建Survivin重组腺病毒质粒,并进行鉴定,为进一步结直肠癌的体内外试验做准备。方法参考shRNA的设计策略,选择Survivin 基因(基因序号为NM_001168.2),利用Primer Premier5.0设计上下游引物,利用NCBI 中的Blast检测序列的特异性,按载体构建的试剂盒进行。将重组质粒与人胚肾293 T细胞混合培养,收集并处理,提纯病毒。构建成功后利用酶切法进行鉴定。结果经PCR法、酶切鉴定后证实Survivin重组腺病毒质粒成功构建。结论利用RNA干扰技术成功构建了Survivin重组腺病毒质粒。
作者:李日恒;胡曼辉;高峰;张彩菊;张瑞;朱红;王建博;魏丹;刘玉英;苏叶;张爱民;安宇亮;程树杰
来源:中国老年学杂志 2014 年 13期