目的 通过RNA干扰技术特异性地使人肝癌细胞株HepG2中血管内皮生长因子(VEGF)-A表达下调,检测细胞凋亡率变化及p-Akt、生成素、caspase-3表达.方法 采用脂质体介导将针对靶基因VEGF-A的小片段RNA导入人HepG2细胞内,用Western印迹和RT-PCR技术检测人HepG2细胞内VEGF-A、p-Akt、生成素、caspase-3的表达,用膜联蛋白(Annexin-V)/碘化丙啶(PU双标记流式细胞术检测细胞凋亡.结果 细胞转染成功后,VEGF-A siRNA组VEGF-A mRNA表达量显著降低,较RNA干扰组下降80.88% (0.26±0.07 vs 1.36±0.05,P<0.01),VEGF-A蛋白表达量显著降低,较RNA干扰组下降75.34% (0.18±0.02 vs 0.73±0.06,P<0.01);细胞凋亡率增加,VEGF-A siRNA组较RNA干扰组增高21.96%(28.21%±1.75% vs 6.25%±0.82%,P<0.01).伴随p-Akt和生存素蛋白水平降低和caspase-3表达上调(P<0.01).结论 通过RNA干扰技术特异性地使人肝癌细胞株HepG2中VEGF-A表达下调,可以诱导HepG2细胞发生凋亡,这可能是通过PBK/p-Akt/生存素信号转导通路实现的.
作者:申建刚;张定国;朱惠明
来源:中国老年学杂志 2016 年 36卷 3期