目的 探讨结肠癌相关转录因子(CCAT)1对过氧化氢(H2O2)诱导的PC12细胞增殖、凋亡和氧化应激的影响及其作用机制.方法 用浓度分别为0、100、200、400μmol/L的H2 O2处理PC12细胞24 h作为不同浓度处理组,以未经任何处理的细胞作为对照(control)组;将pcDNA-control、pcDNA-CCAT1质粒转染至PC12细胞中后再用200μmol/L的H2 O2处理PC12细胞,计为H2 O2+pcDNA-control组、H2 O2+pcDNA-CCAT1组;pcDNA-CCAT1质粒转染至PC12细胞中后用200μmol/L的H2 O2处理PC12细胞后再用雷帕霉素(RAPA)处理作为H2 O2+pcDNA-CCAT1+RAPA组.噻唑蓝(MTT)法测定细胞活力;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测CCAT1表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;Western印迹检测蛋白表达;丙二醛(MDA)试剂盒检测MDA含量;超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、过氧化氢酶(CAT)试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒分别检测SOD、CAT、GSH-Px活力.结果 H2 O2处理PC12细胞中细胞活力显著降低,CCAT1表达水平显著降低,凋亡率显著升高,MDA含量显著升高,SOD、CAT、GSH-Px活力显著降低,丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、RAPA靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、信号转导和转录激活因子(STAT)3、磷酸化STAT(p-STAT)3表达水平显著降低(P<0.05);CCAT1
作者:董丽华;王晓艳;张文婧;李加梅;孙蕾
来源:中国老年学杂志 2021 年 41卷 16期