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目的 探讨miR-100-5p靶向调控mTOR信号通路对人非小细胞肺癌A549细胞自噬的影响.方法 采用A549细胞,实验设置对照组、转染miR-100-5p mimics组、转染miR-100-5p inhibitor组及其对应的无义核酸序列组(mimics NC和inhibitor NC),通过Real time-PCR检测各组细胞中miR-100-5p及自噬相关基因mTOR、Beclin1、LC3及Bcl-2 mRNA相对表达水平;流式细胞术检测瞬时转染后各组细胞的凋亡情况;Western印迹检测miR-100-5p mimics转染48 h后A549细胞中自噬蛋白mTOR的表达情况;最后,通过预测软件结合双荧光素酶报告实验验证miR-100-5p和mTOR之间的靶向关系.结果 A549细胞经过瞬时转染后,对照组、mimics NC组、inhibitor NC组的miR-100-5p、自噬相关基因mTOR、Beclin1、LC3和Bcl-2表达量差异无统计学意义(P>0.05),与mimics NC组比,mimics组miR-100-5p、自噬相关基因表达量显著上调(P<0.05),与in-hibitor NC组比,inhibitor组miR-100-5p、自噬相关基因表达量显著下调(P<0.05),与mimics组比,inhibitor组miR-100-5p、自噬相关基因表达量显著下调(P<0.05).对照组、mimics NC组、mimics组、inhibitor NC组、inhibitor组A549细胞转染48 h细胞凋亡比例,各组差异有统计学意义(F=35.169,P<0.001).mimics组A549细胞转染48 h细胞凋亡比

作者:桂坤;黄昱;王美锦;欧阳伟炜

来源:中国老年学杂志 2021 年 41卷 23期

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作者:
桂坤;黄昱;王美锦;欧阳伟炜
来源:
中国老年学杂志 2021 年 41卷 23期
标签:
miR-100-5p;A549细胞;mTOR;自噬
目的 探讨miR-100-5p靶向调控mTOR信号通路对人非小细胞肺癌A549细胞自噬的影响.方法 采用A549细胞,实验设置对照组、转染miR-100-5p mimics组、转染miR-100-5p inhibitor组及其对应的无义核酸序列组(mimics NC和inhibitor NC),通过Real time-PCR检测各组细胞中miR-100-5p及自噬相关基因mTOR、Beclin1、LC3及Bcl-2 mRNA相对表达水平;流式细胞术检测瞬时转染后各组细胞的凋亡情况;Western印迹检测miR-100-5p mimics转染48 h后A549细胞中自噬蛋白mTOR的表达情况;最后,通过预测软件结合双荧光素酶报告实验验证miR-100-5p和mTOR之间的靶向关系.结果 A549细胞经过瞬时转染后,对照组、mimics NC组、inhibitor NC组的miR-100-5p、自噬相关基因mTOR、Beclin1、LC3和Bcl-2表达量差异无统计学意义(P>0.05),与mimics NC组比,mimics组miR-100-5p、自噬相关基因表达量显著上调(P<0.05),与in-hibitor NC组比,inhibitor组miR-100-5p、自噬相关基因表达量显著下调(P<0.05),与mimics组比,inhibitor组miR-100-5p、自噬相关基因表达量显著下调(P<0.05).对照组、mimics NC组、mimics组、inhibitor NC组、inhibitor组A549细胞转染48 h细胞凋亡比例,各组差异有统计学意义(F=35.169,P<0.001).mimics组A549细胞转染48 h细胞凋亡比