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目的 基于PTEN诱导假定激酶(PINK)1/帕金森病蛋白(Parkin)通路研究灵芝孢子对糖尿病肾病(DN)模型大鼠的肾脏细胞凋亡的影响.方法 32只SPF级雄性SD大鼠(180~200 g),随机分成正常对照(NC)组、高脂高糖(HF)组、DN模型(DN)组和灵芝孢子(GLSP)组.除NC组外,其余各组均采用高脂、高糖饲养,同时DN组和GLSP组均联合腹腔注射2%链脲佐菌素(STZ,50 mg/kg).GLSP组每日灌胃给予灵芝孢子〔300 mg/(kg·d)〕持续3个月,其余组均灌胃给予等量生理盐水〔10 ml/(kg·d)〕.每周测定各组空腹血糖.12 w后评估肾脏功能,用试剂盒检测尿素氮、血清肌酐、24 h尿蛋白等生化指标.苏木素-伊红(HE)、过碘酸希未反应(PAS)和Masson染色用于检查肾脏病理学.通过TUNEL法观察大鼠肾脏组织凋亡细胞的分布及凋亡率情况.通过免疫组化检测肾脏组织中P62、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平.Western印迹检测PINK1/Parkin通路涉及的关键蛋白PINK1、Parkin及微管相关蛋白1轻链(LC)3、P62、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)3、激活型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved)-Caspase3、Bax、Bcl-2表达水平.结果 与NC组相比,DN组尿中出现大量尿蛋白,血清肌酐及尿素氮水平明显升高(P<0.01),肾小体直径增大、肾小囊腔变小、肾小

作者:周广旭;齐亚灵;周少波;吴可佳;张莹;石瑞平;秦丽微;王淑湘;付宏扬;张欣;王淑秋

来源:中国老年学杂志 2022 年 42卷 11期

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作者:
周广旭;齐亚灵;周少波;吴可佳;张莹;石瑞平;秦丽微;王淑湘;付宏扬;张欣;王淑秋
来源:
中国老年学杂志 2022 年 42卷 11期
标签:
灵芝孢子 PTEN诱导假定激酶(PINK)1/帕金森病蛋白(Parkin)通路 糖尿病肾病 自噬 凋亡
目的 基于PTEN诱导假定激酶(PINK)1/帕金森病蛋白(Parkin)通路研究灵芝孢子对糖尿病肾病(DN)模型大鼠的肾脏细胞凋亡的影响.方法 32只SPF级雄性SD大鼠(180~200 g),随机分成正常对照(NC)组、高脂高糖(HF)组、DN模型(DN)组和灵芝孢子(GLSP)组.除NC组外,其余各组均采用高脂、高糖饲养,同时DN组和GLSP组均联合腹腔注射2%链脲佐菌素(STZ,50 mg/kg).GLSP组每日灌胃给予灵芝孢子〔300 mg/(kg·d)〕持续3个月,其余组均灌胃给予等量生理盐水〔10 ml/(kg·d)〕.每周测定各组空腹血糖.12 w后评估肾脏功能,用试剂盒检测尿素氮、血清肌酐、24 h尿蛋白等生化指标.苏木素-伊红(HE)、过碘酸希未反应(PAS)和Masson染色用于检查肾脏病理学.通过TUNEL法观察大鼠肾脏组织凋亡细胞的分布及凋亡率情况.通过免疫组化检测肾脏组织中P62、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达水平.Western印迹检测PINK1/Parkin通路涉及的关键蛋白PINK1、Parkin及微管相关蛋白1轻链(LC)3、P62、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)3、激活型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved)-Caspase3、Bax、Bcl-2表达水平.结果 与NC组相比,DN组尿中出现大量尿蛋白,血清肌酐及尿素氮水平明显升高(P<0.01),肾小体直径增大、肾小囊腔变小、肾小