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目的 建立敏感、特异、定量Real-timePCR方法,用于恙虫病东方体的检测.方法 根据恙虫病东方体56 kD外膜蛋白基因序列设计引物和探针,建立实时荧光定量PCR检测方法.结果 建立的TaqMan-MGB探针具有良好的特异性,建立的荧光定量PCR标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(r=0.99),灵敏性评估发现每个20μlPCR反应管中只要有26个拷贝的目的基因即可被检测到,即最低检出浓度为2拷贝/μl,并且具有较好的重复性.结论 建立的荧光定量PCR方法具有很高的特异性和敏感性,可用于恙虫病东方体感染的快速检测.

作者:付秀萍;贺金荣;张景山;王景泉

来源:中国媒介生物学及控制杂志 2012 年 23卷 2期

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作者:
付秀萍;贺金荣;张景山;王景泉
来源:
中国媒介生物学及控制杂志 2012 年 23卷 2期
标签:
恙虫病东方体 实时荧光定量PCR TaqMan-MGB探针
目的 建立敏感、特异、定量Real-timePCR方法,用于恙虫病东方体的检测.方法 根据恙虫病东方体56 kD外膜蛋白基因序列设计引物和探针,建立实时荧光定量PCR检测方法.结果 建立的TaqMan-MGB探针具有良好的特异性,建立的荧光定量PCR标准曲线的循环阈值(Ct)与模板拷贝数呈良好的线性关系(r=0.99),灵敏性评估发现每个20μlPCR反应管中只要有26个拷贝的目的基因即可被检测到,即最低检出浓度为2拷贝/μl,并且具有较好的重复性.结论 建立的荧光定量PCR方法具有很高的特异性和敏感性,可用于恙虫病东方体感染的快速检测.