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目的 通过宏转录组和高通量测序方法高效检测和分析蚊虫样品中的流行性乙型脑炎(乙脑)病毒.方法 2013年从武汉地区采集蚊虫标本32批(约480只),通过TRIzol加试剂盒的方法对蚊虫进行总RNA提取,对RNA制备RNA文库,应用Trinity、Blast、SeqMan、MAFFT7、MegAlign、PhyML等生物学软件对乙脑病毒全基因组核酸序列进行获取及病毒的系统进化分析.结果 检测到乙脑病毒1株(WH-JEV株),并分析获得其基因组全长10 947 bp,其中从81位到10 367位为开放阅读框,编码3432个氨基酸.该病毒的测序深度为40X,丰度(TPM)为4.19,对比蚊虫转录组里其他病毒属于低表达量病毒.全基因组序列系统进化分析显示WH-JEV株属于基因Ⅰ型乙脑病毒,而与其最近的LN0716株的核酸序列相似度为99.5%,氨基酸序列相似度为100%.结论 利用高通量技术可快速检测出乙脑病毒,并获得相关的全基因组信息.

作者:李辞修;施莽;田俊华;李明慧;覃新程

来源:中国媒介生物学及控制杂志 2015 年 26卷 5期

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作者:
李辞修;施莽;田俊华;李明慧;覃新程
来源:
中国媒介生物学及控制杂志 2015 年 26卷 5期
标签:
RNA测序 高通量技术 流行性乙型脑炎病毒 丰度 系统进化 RNA-seq High-throughput sequencing Japanese encephalitis virus Abundance Phylogeny
目的 通过宏转录组和高通量测序方法高效检测和分析蚊虫样品中的流行性乙型脑炎(乙脑)病毒.方法 2013年从武汉地区采集蚊虫标本32批(约480只),通过TRIzol加试剂盒的方法对蚊虫进行总RNA提取,对RNA制备RNA文库,应用Trinity、Blast、SeqMan、MAFFT7、MegAlign、PhyML等生物学软件对乙脑病毒全基因组核酸序列进行获取及病毒的系统进化分析.结果 检测到乙脑病毒1株(WH-JEV株),并分析获得其基因组全长10 947 bp,其中从81位到10 367位为开放阅读框,编码3432个氨基酸.该病毒的测序深度为40X,丰度(TPM)为4.19,对比蚊虫转录组里其他病毒属于低表达量病毒.全基因组序列系统进化分析显示WH-JEV株属于基因Ⅰ型乙脑病毒,而与其最近的LN0716株的核酸序列相似度为99.5%,氨基酸序列相似度为100%.结论 利用高通量技术可快速检测出乙脑病毒,并获得相关的全基因组信息.